華中農(nóng)業(yè)大學(xué)陳翊平教授課題組在農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法的研究中取得新進(jìn)展

　　1. 研究背景

 

　　食品安全是一項(xiàng)需要重點(diǎn)關(guān)注的民生工程。目前，我國的食品安全問題仍以農(nóng)獸藥殘留、致病菌、非法添加劑等為主。其中，農(nóng)藥殘留因其廣泛性、多樣性備受關(guān)注。全世界開發(fā)的農(nóng)藥種類（有效成分）有1500 種以上，按其化學(xué)成分可分為有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類、苯氧乙酸類、有機(jī)錫類等。農(nóng)藥使用不當(dāng)?shù)仍虺３Ｔ斐赊r(nóng)藥殘留超標(biāo)，而農(nóng)藥殘留對(duì)人體健康危害巨大，會(huì)造成急性中毒或慢性中毒，降低人體免疫力、可致癌、致畸和致突變，甚至造成個(gè)體死亡，而且還會(huì)影響農(nóng)產(chǎn)品的對(duì)外貿(mào)易，也會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重的污染。

 

　　目前，農(nóng)藥殘留的檢測(cè)主要分為以下幾種：（1）儀器分析方法，包括液相色譜儀、氣相色譜法等，這些方法精密度高，但儀器昂貴；（2）免疫分析方法，包括酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、膠體金免疫層析法等，ELISA方法檢測(cè)通量高，但需要多步操作和洗滌，膠體金免疫層析法簡單易操作，但靈敏度不足。這些方法均不能滿足食品中痕量農(nóng)藥殘留的快速靈敏檢測(cè)。因此，迫切建立一種快速、靈敏、簡便的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法用于保障食品安全。

 

　　基于此需求，陳翊平教授課題組將啶蟲脒農(nóng)藥的酶抑制特性與順磁離子轉(zhuǎn)化體系相結(jié)合，構(gòu)建了一種一步混合的雙酶介導(dǎo)Fe2+/Fe3+磁弛豫傳感器，并將其用于果蔬樣品中啶蟲脒的快速高靈敏檢測(cè)。

 

　　2. 相關(guān)研究工作：雙酶介導(dǎo)的Fe2+/Fe3+磁弛豫傳感器的構(gòu)建及其在農(nóng)藥檢測(cè)中的應(yīng)用

 

　?。?）研究方法

 

　　本工作基于農(nóng)藥啶蟲脒的酶抑制特性構(gòu)建了雙酶介導(dǎo)的Fe2+/Fe3+磁弛豫傳感體系。乙酰膽堿酯酶（AChE） 底物氯化乙酰膽堿（ACh）生成膽堿，膽堿進(jìn)而被膽堿氧化酶（CHO）催化生成過氧化氫，而過氧化氫可以誘導(dǎo)Fe2+/Fe3+的轉(zhuǎn)化，進(jìn)而引起橫向弛豫時(shí)間（T2）的變化。在該方法中，啶蟲脒能夠抑制乙酰膽堿酯酶（AChE）的活性，切斷催化反應(yīng)，從而減少膽堿和過氧化氫的產(chǎn)生。而過氧化氫的減少，則會(huì)降低Fe2+/Fe3+的轉(zhuǎn)化程度，進(jìn)而影響磁信號(hào)。因此，可以建立磁信號(hào)與啶蟲脒的相關(guān)性關(guān)系（圖1）。該傳感器具有快速、穩(wěn)定、靈敏等優(yōu)點(diǎn)，可歸結(jié)于兩個(gè)因素：（1）水溶液中的Fe2+/Fe3+均勻穩(wěn)定，信號(hào)輸出穩(wěn)定靈敏；（2）雙酶介導(dǎo)的Fe2+/Fe3+轉(zhuǎn)化的級(jí)聯(lián)反應(yīng)只需要“一步混合”，提高了檢測(cè)效率和靈敏度。

 

　?。?）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

　　本工作首先通過過氧化氫試紙條、高錳酸鉀氧化還原顯色和紫外光譜掃描驗(yàn)證了Fe2+/Fe3+價(jià)態(tài)轉(zhuǎn)化和雙酶介導(dǎo)的H2O2生成體系的可行性（圖2）。在此基礎(chǔ)上，構(gòu)建了基于Fe2+/Fe3+價(jià)態(tài)轉(zhuǎn)化的磁弛豫生物傳感器，并對(duì)氯化乙酰膽堿、乙酰膽堿酯酶和Fe2+的濃度進(jìn)行了優(yōu)化（圖3）。本工作進(jìn)一步對(duì)啶蟲脒進(jìn)行了檢測(cè)，并與分光光度法和傳統(tǒng)酶抑制法進(jìn)行了比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，F(xiàn)e2+-T2磁弛豫傳感器檢測(cè)啶蟲脒的靈敏度是分光光度法的180倍，是傳統(tǒng)酶抑制法的335倍（圖4）。因此，該傳感器在農(nóng)藥殘留檢測(cè)方面具有良好的分析性能和應(yīng)用潛力。

 

　?。?）論文相關(guān)信息：

 

　　本工作發(fā)表于Journal of Hazardous Materials雜志上（Journal of Hazardous Materials, 2021, 403, 123619, IF=9.0）。

 

　　論文獲資助信息：國家自然科學(xué)基金（81671784, 31801638）和中央高校基礎(chǔ)研究基金（2662019PY005）的支持。

 

　　通訊作者信息：陳翊平（E- mail: chenyiping@mail.hzau.edu.cn.）

 

　　論文鏈接：https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2020.123619